畜牧与动物医学论文_余甘子多糖的结构表征及免

文章目录

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验动物

1.3 仪器设备

1.4 余甘子多糖的制备

1.5 余甘子多糖糖含量的测定

1.6 多糖的结构鉴定

    1.6.1 紫外光谱

    1.6.2 红外光谱

    1.6.3 单糖组成分析

    1.6.4 扫描电镜

1.7 试验动物分组与处理

1.8 样品采集与处理

    1.8.1 NDV特异性抗体水平检测

    1.8.2 IL-4和INF-γ水平检测

    1.8.3 PEP对外周血T淋巴细胞CD4+/CD8+的影响

    1.8.4 免疫器官处理

        1.8.4.1 MTT法测定鸡脾淋巴细胞的增殖:

        1.8.4.2 免疫器官指数:

        1.8.4.3 免疫器官组织病理学观察:

1.9 数据处理

2 结 果

2.1 余甘子多糖的分离纯化

2.2 余甘子多糖的糖含量

2.3 余甘子多糖的结构表征

    2.3.1 紫外光谱分析

    2.3.2 红外光谱分析

    2.3.3 单糖组成分析

    2.3.4 扫描电镜分析

2.4 PEP对NDV特异性抗体水平的影响

2.5 PEP对IL-4水平的影响

2.6 PEP对INF-γ水平的影响

2.7 PEP对外周血T淋巴细胞CD4+/CD8+的影响

2.8 PEP对脾淋巴细胞增殖的影响

    2.8.1 脾T淋巴细胞增殖

    2.8.2 脾B淋巴细胞增殖

2.9 PEP对免疫器官指数的影响

2.10 免疫器官组织病理学分析

3 讨 论

3.1 余甘子多糖的结构表征与功能关系分析

3.2 余甘子多糖增强免疫活性分析

3.3 余甘子多糖对免疫器官的影响

4 结 论

文章摘要:本试验旨在制备余甘子多糖（Phyllanthus emblica polysaccharide, PEP）,通过对其结构表征进行分析,探索PEP对鸡新城疫（Newcastle disease, ND）疫苗免疫效果的影响。利用紫外光谱（ultraviolet spectroscopy, UV）、红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy, FT-IR）、高效液相色谱分析法（high performance liquid chromatography, HPLC）和扫描电镜（scanning electron microscope, SEM）分析PEP结构;选取175只1日龄河田鸡,随机分成5组,每组35只,分别为空白对照组,疫苗对照组,PEP低、中、高剂量组。除空白对照组外均用ND疫苗进行免疫,7日龄首免,并于28日龄二免。在免疫的同时,PEP低、中、高剂量组分别按照10、20、30 g·L^-1的剂量给药PEP溶液0.5 mL,疫苗对照组和空白对照组给予等量生理盐水,每天1次,连续3 d。分别于7、14、21、28、35、42和49日龄时,测定血清中新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV）特异性抗体水平以及γ-干扰素（INF-γ）和白介素4（IL-4）的水平;于28和49日龄时测定外周血淋巴细胞增殖活性和T淋巴细胞CD4⁺/CD8⁺的比值;于49日龄剖杀后采集脾、法氏囊、胸腺和肝进行组织学观察以及检测免疫器官指数。结果表明,PEP为白色棉絮状,糖含量为（86.70±1.05）%,结构分析结果表明,PEP是含α型糖苷键的多糖,其组分均一,不含核酸和蛋白质,呈片状分布,总体结构规整且致密,单糖组成为葡萄糖醛酸（glucuronic acid, GlcA）、葡萄糖（glucose, Glu）、木糖（xylose, Xyl）和岩藻糖（fucose, Fuc）,其摩尔比为0.5∶8.3∶1.8∶0.3。动物试验结果表明,PEP能显著提高鸡血清中NDV特异性抗体、INF-γ和IL-4的水平（P<0.05）,还能显著促进鸡外周血淋巴细胞增殖和T淋巴细胞CD4⁺/CD8⁺的比值（P<0.05）,提高免疫器官指数（P<0.05）,激活脾、法氏囊、胸腺和肝等器官的免疫功能。PEP糖含量高,结构稳定,可提高机体免疫活性,具有较良好的佐剂活性,对ND具有良好的防治效果。

文章关键词:

论文分类号:S853.7

文章来源：《中国疫苗和免疫》 网址: http://www.zgymhmy.cn/qikandaodu/2021/0929/1960.html